Présentation du laboratoire
Description de la visite
L’objectif de cette visite insolite est d’immerger les participants dans le quotidien d’un laboratoire de recherche.
Pour atteindre cet objectif il faut relever ses manches, s’habiller en chercheur et faire des expériences !
Notre laboratoire CRIBL étudie le développement normal et pathologique d’une cellule particulière du système immunitaire : le lymphocyte B. (pour en savoir plus visitez notre site internet https://www.unilim.fr/cribl/). Nous l’étudions « sous toutes les coutures ».
Après avoir « fait connaissance » avec le laboratoire et le lymphocyte B, les participants réaliseront des expériences de biologie moléculaire et cellulaire :
1- Observation et manipulation de cellules en suspension sous un PSM 2 :
- Présentation d’un PSM, d’un incubateur, d’une centrifugeuse…
- Visualisation des cellules sorties de l’incubateur à l’aide d’un microscope
- Explication vulgarisée du principe de culture cellulaire
- Démonstration et surtout manipulation de chaque participant : prélever des cellules dans un tube en milieu stérile (sous PSM) et les centrifuger
Objectif : centrifuger les cellules pour récupérer d’une part le surnageant pour dosage par ELISA et d’autre part le culot cellulaire pour extraction de l’ADN…
2- Extraction de l’ADN (en réalité de l’ADN d’oignons) : chaque participant extrait l’ADN d’un tube et observe la formation d’une pelote d’ADN.
3- Préparation d’une PCR (Polymerase Chain Reaction) et présentation des appareils permettant l’amplification : objectif, manipuler les micropipettes et de très petits volumes.
4- Visualisation d’un gel de migration d’ADN amplifié à l’issue d’une PCR (réalisée dans la journée, en amont de la visite) : sur Gel d’agarose expliquer à quoi correspondent les bandes que l’on visualise et pour quoi nous avons besoin de les visualiser.
5- Dosage d’Ig sur surnageant prélevé en salle de culture. Les participants réalisent la phase finale d’un ELISA (révélation) préparé en amont de la visite et la lecture en plaque : présentation du type de résultats obtenus (ici dosage d’Ig ) ; explication vulgarisée du principe du dosage à l’aide d’une gamme étalon.
6- Visualisation de cellules en 3D à l’aide d’un microscope confocal :
- Une lame de FISH 3D réalisée par une doctorante du laboratoire dans le cadre des projets de recherche menés au sein de l’UMR
- Acquisition d’un image 3D
- Analyse à l’aide d’un logiciel d’analyse d’images d’une acquisition préalablement réalisée
- Explication du résultat obtenu (distance d’un gène par rapport au centre du noyau) et remise dans le contexte scientifique (régulation épigénétique)
Soutiens
